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干涸组织的补救办法

时间:2015-10-15  阅读:4241次

        由于机器故障等各种原因导致组织在脱水过程中长时间暴露在空气中,引起组织干涸发硬。解决方法:组织干涸导致组织内水分减少时一般采取95%乙醇和无水乙醇短时间处理(各半小时),防止组织进一步硬化,然后用二甲苯透明,常规浸蜡(可适当延长透明、浸蜡时间)。也可以用30%丙三醇水溶液里浸泡几小时后洗干净再脱水、透明、浸蜡。组织干涸后最大的问题是细胞核无法上色,这在组织处理不佳时也同样存在,导致切片无法诊断。笔者通过长期的实践,发现用EDTA 或EGTA 溶液煮沸20 分钟(高压锅隔水加热,带帽出气后3 分钟)可以解决部分问题。也可将组织切片脱蜡至水后放入丙酮内处理5-10分钟(或60℃5-6分钟)。对于由于组织脱水不佳、组织干涸引起细胞核不能着色,用1%二氯化钴染色法可能会有所改善。
Dingwei's 1%二氯化钴染色法:
(1)切片脱蜡至水后,在1%二氯化钴溶液内浸泡过夜(高压锅内隔水加热,带帽出气后3 分钟也可以达到同样的效果,但氯化钴气体可能有一定的毒性,如非十分紧急,不要使用)。
(2)水洗。
(3)苏木素染色5-10分钟,水洗。
(4)1%盐酸乙醇分化。
(5)水洗。
(6)流水蓝化。
(7)伊红染色(经1%二氯化钴溶液处理后,胞浆略有苏木精非特异性着色,伊红不容易着色,故染色时间要延长)。
(8)梯度乙醇脱水、二甲苯透明、中性树胶封固。
结果:无法着色的细胞核颜色加深。但是,此染色仅仅是核染色的加深,已经变性的细胞膜、染色质颗粒均无法复原。




参考文献:
1、王伯沄,李玉松,黄高升,张远强《病理学技术》
2、凌启波《实用病理特殊染色和组化技》
3、刘介眉等《病理组织染色的理论方法和应用》
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