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苏木素配法

时间:2018-03-19  阅读:2284次

一、 苏木素
(1) Harris苏木素(退行性染色):
 配方:
     苏木素  1 g        无水乙醇    10 ml
     蒸馏水 200 ml      硫酸铝钾 20g       
     HgO  0.5 g
    先将苏木素溶于无水乙醇中,备用。把硫酸铝钾(起媒染作用。媒染剂:凡能与染料与组织结合,生成色淀,并促进染色的金属离子盐类或金属原子的含氧酸)放入蒸馏水,加热溶解,再加入备用的苏木素,煮沸 2 分钟,先加入少量的氧化汞,防止氧化过程中苏木素外溢,玻棒搅拌,然后,边搅拌边加入氧化汞。加完后,立即移至冰水中,加速其冷却,静置一夜后,过滤。用前以 5% 的比例加入冰醋酸。如配好后时间较长,冰醋酸的量可适当多加一点。冰醋酸的量,可直接影响苏木素的着色能力和清晰度。加少了,会造成核浆共染,背景不干净;加多了,核着色能力下降。此液可放置3月至半年左右,视气温而定。使用期要看染色的切片量来定:以每天100张片的量,可使用半个月左右。
  
(2)Gill改良苏木素液(进行性染色):
      苏木精         2  g              无水酒精     250   ml
      硫酸铝        17.6  g            蒸馏水       750   ml
      碘酸钠        0.2-0.3  g         冰醋酸      15-25 ml
    先将苏木精溶于无水酒精,硫酸铝溶于蒸馏水,然后两液混合后加入碘酸钠,最后加入冰醋酸。此液为半氧化进行性苏木素液,不会产生沉淀,氧化膜少。常有人配制此液染不上色或染色较慢,可能是碘酸钠量的原因,可根据气温变化多加一点(气温在30度时,一般碘酸钠量为0.25 g,气温每降低5度,可增加0.01 g,反之可减少)。有人用硫酸铝钾代替硫酸铝,也可以,着色能力略强于硫酸铝,染液会产生沉淀和结晶。也可以采用加温溶解配制,可促进氧化,增强着色能力。

    Gill改良苏木素液色浅的原因与其苏木精、硫酸铝的量少也有关,因此我们对配方略作改良:
     苏木精          5  g             无水酒精   400 ml
      硫酸铝         44 g              蒸馏水     1000   ml
      碘酸钠         0.4-0.5 g         冰醋酸     20-50 ml
   配制:先将苏木精溶于无水乙醇,硫酸铝溶于蒸馏水,然后将两液混合( 如果在室温低于23-24℃时,选择混合后加温至50-60℃), 然后加入碘酸钠,最好过几天后再加入乙酸。 此液需要分化。此苏木精液在有效期内每500ml可染切片1500-2000张左右。
苏木素等试剂购买可以通过Sigma-Aldrich中国网站购买:https://www.sigmaaldrich.com/china-mainland.html,检索商品Hematoxylin,也可检索货号H9627,选择H9627-100g(我们喜欢买100g大包装,价格相对便宜,也可以买25g)。




参考文献:
1、王伯沄,李玉松,黄高升,张远强《病理学技术》
2、凌启波《实用病理特殊染色和组化技》
3、刘介眉等《病理组织染色的理论方法和应用》
本栏目内容只供网友们学习研究用,不得用于商业行为。

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