过碘酸-Schiff(PAS)染色法 试剂配制: 碱性品红 1 g ,活性炭 2 g ,当量盐酸 20 ml ,偏重亚硫酸钠 1.5 g Schiff试剂配制: 1. 碱性品红1g,放入200毫升蒸馏水中,煮沸,搅拌,充分溶解。 2. 冷却至50℃时过滤,滤液中加入当量盐酸20毫升。 3. 加偏重亚硫酸钠 1.5 g,置于暗处过夜。 4. 加活性炭2 g,摇晃,过滤,以无色为最佳。棕色瓶,4℃冰箱保存。
所谓Schiff’s试剂冷配法,就是将热配法的配方,依次加入容器,用震荡器震荡2小时,然后加活性炭1克,震荡10分钟,过滤便可使用。
染色步骤: 1. 切片脱蜡至蒸馏水。 2. 1%过碘酸水溶液5-10分钟。 3. 蒸馏水洗多次。 4. Schiff液10-15分钟。 5. 0.5%偏重亚硫酸钠 (钾)水溶液洗2次(1-2分钟) 6. 流水冲洗10分钟。 7. 苏木素复染。(1-2分钟) 8. 酒精脱水,二甲苯透明,树胶封固。 结果:糖原红色。 注意:1.阴性对照片用淀粉酶消化处理。 2.糖原容易水解,取材标本最好新鲜,不要经过水洗。 3.固定液用中性福尔马林为佳。 4.如Schiff液发红, 再加入少量偏重亚硫酸钠,使液体颜色变清后又可使用. 糖原染色的应用: 1. 鉴定肝糖原,肌糖原;观察某些代谢疾病。除此之外, 由先天遗传缺陷引起的糖原累积病时,在肝、肾、心肌或骨 骼肌等均有大量糖原沉积。 2.显示多种真菌的菌丝及孢子。 |