过碘酸-Schiff(PAS)染色法 试剂配制: 碱性品红 1 g ,活性炭 2 g ,当量盐酸 20 ml ,偏重亚硫酸钠 1.5 g Schiff试剂配制: 1. 碱性品红1g,放入200毫升蒸馏水中,煮沸,搅拌,充分溶解。 2. 冷却至50℃时过滤,滤液中加入当量盐酸20毫升。 3. 加偏重亚硫酸钠 1.5 g,置于暗处过夜。 4. 加活性炭2 g,摇晃,过滤,以无色为最佳。棕色瓶,4℃冰箱保存。
所谓Schiff’s试剂冷配法,就是将热配法的配方,依次加入容器,用震荡器震荡2小时,然后加活性炭1克,震荡10分钟,过滤便可使用。
染色步骤: 1. 切片脱蜡至蒸馏水。 2. 1%过碘酸水溶液5-10分钟。 3. 蒸馏水洗多次。 4. Schiff液10-15分钟。 5. 0.5%偏重亚硫酸钠 (钾)水溶液洗2次(1-2分钟) 6. 流水冲洗10分钟。 7. 苏木素复染。(1-2分钟) 8. 酒精脱水,二甲苯透明,树胶封固。 结果:中性粘液呈红色。
阿尔辛蓝(AB)染色法(pH2.5) 试剂配制:爱先蓝液: 爱先蓝8GX 1g ,蒸馏水 97 ml,冰醋酸 3 ml 核固红液: 核固红 0.1g,硫酸铝 5g,蒸馏水 97ml 染色步骤: 1. 切片脱蜡至蒸馏水。 2. 爱先蓝液染10~20分钟 3. 蒸馏水洗 4. 核复染(核固红5分钟),水洗 5. 脱水,透明,封固。 结果:唾液酸及弱硫酸化粘液及一般粘液呈蓝色。常用于确定胞浆内空泡的性质,特别是当细胞呈现印戒样特征时。
阿尔辛蓝过碘酸雪夫(AB-PAS)染色法 试剂配制: 爱先蓝液: 爱先蓝8GX 1g ,蒸馏水 97 ml,冰醋酸 3 ml 核固红液: 核固红 0.1g,硫酸铝 5g,蒸馏水 97ml 碱性品红 1 g ,活性炭 2 g ,当量盐酸 20 ml ,偏重亚硫酸钠 1.5 g Schiff试剂配制: 1. 碱性品红1g,放入200ml蒸馏水中,煮沸,搅拌,充分溶解。 2. 冷却至50℃时过滤,滤液中加入当量盐酸20ml。 3. 加偏重亚硫酸钠 1.5 g,置于暗处过夜。 4. 加活性2 g,摇晃,过滤,以无色为最佳。棕色瓶,4℃冰箱保存。 染色步骤: 1. 切片脱蜡至蒸馏水。 2. 爱先蓝液染10~20分钟 3. 蒸馏水洗 4. 1%过碘酸水溶液5-10分钟。 5. 蒸馏水洗多次。 6. Schiff液10-15分钟。 7. 流水冲洗10分钟。 8. 酒精脱水,二甲苯透明,树胶封固。 结果:中性粘液呈红色,酸性粘液物质呈蓝色。中性与酸性粘液的混合物质呈紫红色。
Southgate胭脂红染色 试剂配制: 1.Southgate贮备液:胭脂红 1g,无水酒精 50ml,蒸馏水 50ml升,氢氧化铝 1 g,无水氯化铝 0.5 g 先将无水酒精和蒸馏水1:1混合,依次加入试剂,搅拌,水浴中煮沸3分钟,冷至室温过滤,并用50%酒精加至总量100ml,磨纱瓶冰箱保存。 2.Southgate稀释液:用前取10ml贮存液加蒸馏水40ml。 3.马休黄液:将马休黄0.5 g溶于100ml95%酒精中,再加入磷钨酸2 g。 染色步骤: 1. 切片脱蜡至水 2. 苏木素染5~10分钟 3. 水洗,1%盐酸酒精分化 4. 水洗,蓝化 5. Southgate稀释液染30分钟 6. 水洗 7. 95%酒精洗二次 8. 马休黄液复染15~20分钟(这一步可不染) 9. 水稍洗 10. 脱水,透明,封固 结果:酸性粘液及新型隐球菌荚膜呈红色,其他组织黄色。 粘蛋白染色的应用: 1. 鉴定粘液性肿瘤、印戒细胞的性质。 2. 观察慢性气管炎粘液腺的活动状态。 3. 观察基底膜结构及完整性。 4. 鉴别肠上皮化生的类型。 |