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基底膜

时间:2007-12-23  作者:丁伟  阅读:17524次

六胺银法(改良的Grocott,1955;Jones,1957)
试剂配制:
(1)0.5%高碘酸水溶液:高碘酸0.5g,蒸馏水加至100ml
(2)0.5%偏重亚硫酸钠溶液:偏重亚硫酸钠0.5g,蒸馏水加至100ml
(3)8%铬酸水溶液:铬酸8g,蒸馏水加至100ml
(4)Gomori氏六胺银贮备液:5%硝酸银液5ml,3%六次甲基四胺100ml
将5%硝酸银液慢慢加入3%六次甲基四胺水溶液中,即形成乳白色沉淀,在摇动中沉淀溶解变清,澄清液盛于棕色小口砂塞瓶内,置于4℃冰箱保存待用。
(5)5%四硼酸钠水溶液:四硼酸钠5g,蒸链馏水加至100ml
(6)六胺银工作液:Gomori氏六胺银贮备液10ml,蒸馏水25ml ,5%四硼酸钠水溶液2ml。先将四硼酸钠液加入蒸馏水中,然后加入Gomori氏六胺银贮备液,混合均匀后即可使用。
操作方法:
1、常规脱蜡至水。
2、0.5%高碘酸氧化15分钟。
3、流水冲洗5分钟。
4、8%铬酸氧化30分钟。
5、流水稍洗。
6、1%偏重亚硫酸钠液处理1分钟。
7、流水冲洗5分钟,再用蒸馏水洗。
8、切片放入预热60℃的六胺银工作液中,于60℃恒温箱内作用30-60分钟,直至见到切片在黄棕色的背景中见有黑色反应时,取出切片,蒸馏水洗后镜下检查,以肾小球毛细血管基底膜出现黑色的银沉淀为标准。如着色不够深,可用蒸馏水冲洗后再放回六胺银工作液中继续作用。
9、蒸馏水稍洗。
10、0.1%氯化金水溶液调色2分钟。
11、蒸馏水稍洗。
12、3%硫代硫酸钠液处理3分钟。
13、自来水冲洗5分钟。
14、用苏木素作对比染色。
15、各级酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
结果:肾小球囊基底膜和肾毛细备管球基底膜呈黑色。霉菌、弹力纤维及一些网状纤维也呈黑色。




参考文献:
1、王伯沄,李玉松,黄高升,张远强《病理学技术》
2、凌启波《实用病理特殊染色和组化技》
3、刘介眉等《病理组织染色的理论方法和应用》
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